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Partner: CLS Cell Lines Service | Hölzel Diagnostika

CLS Cell Lines Service

CLS Cell Lines Service GmbH wurde 1998 in Deutschland gegründet und mehrfach durch die Qualitätsmanagementnorm ISO 9001 zertifiziert. Mit mehr als 500 Zelllinien in ihrer Zelldatenbank bieten sie eine große Bandbreite an Zelllinien, mit Schwerpunkt auf humanen Zelllinien, an. Eine jährliche Expansion des Produktangebotes, durch Zertifizierungen und Kooperationen ermöglicht ein stetiges Wachstum für mehr Angebote in Life Science und der medizinischen Grundlagenforschung.

Die täglichen mikroskopischen Kontrollen der Zelllinien für die Quantitäts- und Qualitätskontrolle hat einen enormen Umfang an Bildmaterial produziert, welches in dem 2013 veröffentlichten Lehr- und Hilfsmittel Atlas of Living Cell Cultures (Prof. Dr. Toni Lindl) genutzt wurde.

CLS bietet eine große Bandbreite an Service Leistungen durch fortlaufende Weiterbildungen an, z. B. Testung auf Mykoplasmen Kontaminationen oder die Durchführung von Transfektionen.

Produkte wie genomische RNA und DNA, Zelllysate und schockgefrorene Zellpellets werden aus den Zelllinien generiert.

Ziel von CLS ist es, ein Verständnis der millionenfachen Abläufe innerhalb einer einzelnen Zelle zu schaffen, welches zu Erkenntnissen über Krankheiten führt. Dies soll mit Hilfe von permanenten und primären Zelllinien gelingen, welche sich als ein wesentlicher Bestandteil von der Grundlagenforschung entwickelt haben. Durch diesen Ansatz sollen die Entwicklungen von Therapie und Medikamenten verbessert werden. Außerdem können In-Vitro-Versuche an Zelllinien eine Vielzahl an Tierversuchen ablösen und eine zukunftsbringende Alternative bieten.

Produkte

Zellen

Die mehr als 500 verschiedenen Zelllinien werden in Unterkategorien gegliedert. Um einige Beispiele heranzuführen:

B-LCL (Lymphoblastoide) Zelllinien welche aus nativen B-Lymphozyten, durch Infektion mit Epstein-Barr Virus (EBV) hergestellt werden. Nach der EBV induzierten Transformation können die B-LCL in kontinuierlicher Zellkultur gehalten werden.

CLS verfügt über mehr als 375 humane Zelllinien in ihrem Portfolio, darunter verschiedene Tumorzelllinien u. A. Brustkrebs, Harnblasen-Tumor, Leukämie und Lymphom-Zellen.

Die Fluoreszenz-markierten Zelllinien mit den Unterkategorien HeLa Kyto Zellen Fluoreszenz markiert, HeLa R19 Flpln TREXs, NRK Zellen Fluoreszenz markiert und U-2 OS genom-editierte Zelllinien bilden eine weitere Produktkategorie.

Produktionszellen: Einige wenige Zelllinien (z.B.: CHO-K1 und ACE2) eignen sich am besten für die Expression von Genen und der Upscaling Produktion von rekombinanten Proteinen. Diese Systeme haben eine große Bedeutung in der Biotechnologie und pharmazeutisch-medizinischen Anwendung.

Zelllinien für seltene Krankheiten: Als seltene Erkrankungen werden schweren Krankheiten definiert, die eine kleine Zahl von Menschen betreffen. Genauer: weniger als 5 Personen von 10.000 Menschen in der EU, sind von der jeweiligen Krankheit betroffen. Da es mehr als 6000 verschiedene seltene Erkrankungen in der EU gibt, ist die Gesamtzahl der Betroffenen trotz der Seltenheit der jeweiligen einzelnen Erkrankung hoch. So ist in der EU von rund 30 Millionen betroffenen Menschen auszugehen, was den Bedarf an Zelllinien als Forschungsgrundlage wiederspiegelt (Bundesministerium für Gesundheit). CLS hat das Ziel eine Zelllinienbank aufzubauen, um seltene Krankheiten und deren biologische und systematisch genetische Untersuchungen zu ermöglichen. Damit sollen bessere diagnostische und therapeutische Mittel entwickelt werden können. Zu diesem Zweck werden die oben genannten immortalisierten B-CLC Zelllinien verwendet.

DNA und Zellpellets

Genomische DNA (gDNA) wird aus der CLS Zellbank gewonnen. Dafür wird eine Zelllyse, der Zusatz von Proteinkinase K und RNase A eingesetzt, die Aufreinigung erfolgt über Säulen. Die Quantitätsbestimmung der gDNA erfolgt mittels Absorptionsmessung im NanoDrop. Die Lagerung erfolgt im TE Puffer und der Versand bei Raumtemperatur. Die erhaltene gDNA kann für die PCR und die Southern Blot Anwendung genutzt werden, des Weiteren für die Bestimmung der Einzelnukleotid-Polymorphismen, der Erstellung einer DNA-Bibliothek, sowie für Genexpressionsstudien.

Medien und Supplemente

CLS bietet im Bereich Medien und Supplemente zwei neue Produkte an: SciNX ist ein chemisch definiertes, serum-, protein- und tierkomponentenfreies Medium für die kontinuierliche Standardkultur von adhärenten sowie Suspensionszelllinien. Optimale Ergebnisse liefert SciNX bei der Produktion von rekombinanten Proteinen und Exosomen. SciN4Vero ist ebenfalls ein chemisch definiertes, serum- und tierkomponentenfreies Medium supplementiert mit rekombinanten menschlichen Wachstumsfaktoren. Die einzigartige Formulierung dient zur Vermehrung der proprietären VERO-CDM. Der niedrige Proteingehalt (<2 mg/L) erleichtert die rekombinante Protein- und/oder Virusproduktion.

Weiterhin bietet CLS Dissoziationslösungen, Differenzierungsmedien, Einfriermedien, humane Thrombozytenlysate, iPSC Medien, konditionierte Medien, Puffer und Lösungen, serumfreie Zellkulturmedien, sowie Supplemente und Zellkulturmedien an und stellen die verfügbaren Unterkategorien dar.

Exosomen

Exosomen sind kleine extrazelluläre Vesikel, die von den meisten Zelllinien in vivo und in vitro produziert werden. Sie haben die wichtige Funktion für die zelluläre Kommunikation zu dienen z. B. als Transporter für Proteine. Diese Aufgabe, als auch die Funktion als Biomarker, bekommen zunehmend an Bedeutung für die funktionelle Charakterisierung bzw. Arzneimittelabgaben. Sie unterliegen verschiedenen strengen Qualitätskontrollen, wodurch u. a. die Reinheit kontrolliert wird. Es sind sowohl Exosomen aus humanen Zelllinien von gut charakterisierten Tumor-Zelllinien (z.B.: Colon Adenocarcinoma ↔ HT-29 & HCT116), als auch gut charakterisierte tierische Zelllinien verschiedener Organismen wie z.B: Rat Colon Carcinoma ↔ CC531, erhältlich.

Kits

Mikrokern Tests dienen der Aufdeckung von Chromosomenschäden und Schäden des Spindelapparats der an sich teilenden Zellen in vivo oder in vitro durchgeführt wird. Entwickelt wurde dieser Test um das gentoxische Potential nachzuweisen.

Die WST-1 -Lösung dient zur Bestimmung der Proliferation von Zelllinien und Zellen. Die Bestimmung erfolgt durch eine Farbreaktion, welche nur durch lebensfähige Zellen stattfinden kann. Die Absorption bei 420-480 nm korreliert mit der Anzahl lebensfähiger Zellen.

Service

CLS bietet verschiedene Service Leistungen für Zellkulturen an, wie die Bulk-Abfüllung, oder die Etablierung von Zelllinien aus Gewebe oder Blut. Des Weiteren wird ein Service für die Immunzytochemie angeboten, also für die Immunfluoreszenz, Durchflusszytometrie, Cellbanking und Transfektionen. Weitere Dienstleistungen, als auch individuelle Aufträge sind auf Anfrage möglich.