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Question 1: Can I use fluorescently-labeled phalloidin to stain F-actin in living cells?
Answer 1: Unfortunately, no, phalloidin cannot be used to stain F-actin in living cells. Phalloidins are used to stain F-actin in fixed cells. Fluorescent phalloidins only bind to the native quaternary structure of F-actin which provides a low background. The correct fixation condition for phalloidin binding is 3.7% (v/v) paraformaldehyde in PBS for 10 min because it retains the quaternary protein structure which is necessary for high affinity binding of phalloidin. Methanol fixation destroys the native conformation and hence is not suitable for F-actin staining with phalloidin. To monitor actin dynamics in living cells, micro-injection of rhodamine-labeled actin (CAt. #APHR or AR05-C) is recommended. Please see those datasheets for more information.
Question 2: Which of the fluorescently-labeled phalloidin is the most stable/brightest?
Answer 2: The brightest and most stable of the Acti-stains is Acti-stain 488 (green fluorescence, Cat. #PHDG1)
Actin staining is very useful in determining the structure and function of the cytoskeleton in living and fixed cells. The actin cytoskeleton is a very dynamic and labile structure in the living cell, but it can be fixed with paraformaldehyde prior to probing or staining for actin structures.
Hinweis: Die dargestellten Informationen und Dokumente (Bedienungsanleitung, Produktdatenblatt, Sicherheitsdatenblatt und Analysezertifikat) entsprechen unserem letzten Update und sollten lediglich der Orientierung dienen. Wir übernehmen keine Garantie für die Aktualität. Für spezifische Anforderungen bitten wir Sie, uns eine Anfrage zu stellen.
Alle Produkte sind nur für Forschungszwecke bestimmt. Nicht für den menschlichen, tierärztlichen oder therapeutischen Gebrauch.
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